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蛋白激酶G ELISA試劑盒生物活性及測定原理
以下是本生技術(shù)小編對蛋白激酶G(PKG)ELISA試劑盒的生物活性及測定原理的詳細說明:
一、蛋白激酶G的生物活性?
激活機制?
PKG作為第二信使cGMP的主要受體,當(dāng)cGMP結(jié)合其調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域時,會解除N末端結(jié)構(gòu)域?qū)Υ呋诵牡囊种?,從而激活酶活性?br/>
主要功能?
平滑肌松弛?:通過激活鈣激活鉀通道,導(dǎo)致細胞超極化和松弛。
細胞增殖與凋亡調(diào)控?:在多種細胞類型中,激活的PKG可抑制增殖或誘導(dǎo)凋亡。
其他作用?:參與血小板功能、精子代謝及核酸合成的調(diào)節(jié)。
亞型差異?
PKG-I型?:主要位于細胞質(zhì),參與多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。
PKG-II型?:通過肉豆蔻?;^定在質(zhì)膜上,功能與定位相關(guān)。
二、ELISA測定原理?
雙抗體夾心法?
包被階段?:抗PKG抗體(捕獲抗體)固定在微孔板表面。
結(jié)合階段?:待測樣本中的PKG與捕獲抗體特異性結(jié)合。
檢測階段?:酶標記的抗PKG抗體(檢測抗體)形成“抗體-抗原-抗體"復(fù)合物。
顯色階段?:酶催化底物(如TMB)產(chǎn)生顏色反應(yīng),吸光度與PKG濃度正相關(guān)。
技術(shù)特點?
高靈敏度?:檢測下限可達pg/mL級別。
高特異性?:特異性識別PKG,避免與其他激酶交叉反應(yīng)。
三、實驗注意事項?
樣本處理?:避免反復(fù)凍融,新鮮樣本需充分混勻后檢測。
標準曲線?:需使用新鮮配制的標準品溶液,確保準確性。
四、試劑盒規(guī)格與性能?
規(guī)格?:常見48T/96T,適用于血清、血漿等樣本。
精密度?:批內(nèi)差CV<10%,批間差CV<12%。
如需進一步優(yōu)化實驗方案,可參考試劑盒說明書或選擇代測服務(wù)。
注:以上資料僅供參考,具體詳情來咨詢技術(shù) 老師或品牌供應(yīng)商。
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