本生帶您了解、TAE緩沖液與TBE緩沖液的作用區(qū)別

　　分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的電泳緩沖液主要有三種：TAE、TBE和TPE。TBE與TPE緩沖容量高，DNA分離效果好，但TPE會導(dǎo)致DNA片段回收時(shí)含磷酸鹽濃度高，容易使DNA沉淀。TAE緩沖容量低，但價(jià)格較便宜，TBE緩沖液含有的EDTA可螯合二價(jià)陽離子，可抑制DNase活性，防止PCR擴(kuò)增產(chǎn)物降解。

　　TAE緩沖液的特點(diǎn)：

　　TAE是使用泛的緩沖系統(tǒng)。其特點(diǎn)是超螺旋在其中電泳時(shí)更符合實(shí)際相對分子質(zhì)量(TBE中電泳時(shí)測出的相對分子質(zhì)量會大于實(shí)際分子質(zhì)量)，且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%，電泳大于13kb的片段時(shí)用TAE緩沖液將取得更好的分離效果，此外，回收DNA片段時(shí)也易用TAE緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳。TAE的缺點(diǎn)是緩沖容量小，長時(shí)間電泳(如過夜)不可選用，除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換。

　　TBE緩沖液的特點(diǎn)：

　　TBE 緩沖液也是常用的核酸電泳緩沖鹽溶液，主要用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳。TBE的主要成分是Tris-硼酸鹽與EDTA，緩沖能力強(qiáng)，適合較長時(shí)間電泳，分辨率較高，電泳小于1kb的片段時(shí)分離效果好。TBE 緩沖液中的硼酸成分會影響DNA回收效率以及后續(xù)的酶反應(yīng)，TBE用于瓊脂糖凝膠時(shí)易造成高電滲作用，并且因與瓊脂糖相互作用生成非共價(jià)結(jié)合的四羥基硼酸鹽復(fù)合物而使DNA片段的回收率降低，所以不宜在回收電泳中使用。若要進(jìn)行DNA片段的瓊脂糖凝膠電泳回收實(shí)驗(yàn)，建議使用TAE 緩沖液。

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